五、简答题(本大题共6小题，每题5分，共30分。)

1.什么是蛋白质变性?哪些因素可引起蛋白质变性?

答：蛋白质变性即蛋白质分子的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象。蛋白质在受到光照、热、有机溶剂以及一些变性剂的作用时，次级键遭到破坏导致天然构象的破坏，但其一级结构不发生改变。(3分)变性因素：热、辐射、震荡、有机溶剂、酸或碱(pH)、高盐、重金属、生物碱试剂、表面活性剂等。(2分)

2.如使酶促反应速度达99%Vmax，底物浓度应为km值的多少倍?

答：将V=99%Vmax带入米氏方程，得[S]=99 Km。(过程)

3.影响核酸热变性与复性的因素有哪些?

答：热变性因素：GC含量多，Tm高;DNA均一性高，变性范围狭窄;介质离子强度高，Tm高。(2分)复性因素：温度下降慢，容易复性;链越长，复性速度越慢;浓度大，核酸复性快;重复序列多，复性快。(3分)

4.什么是PCR技术?请简述其过程。

答：聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加(2分)。基本过程为①高温解链②退火③链延伸。(3分)

5.什么是生物氧化，生物氧化有哪些方式?

答：生物氧化是在生物体内，从代谢物脱下的氢及电子﹐通过一系列酶促反应与氧化合成水﹐并释放能量的过程。也指物质在生物体内的一系列氧化过程。主要为机体提供可利用的能量。(3分)其氧化还原的方式有加氧、脱氢、脱电子等，以脱氢氧化的方式为主，底物分子脱氢的同时常伴有电子的转移。(2分)

6.脂肪酸的合成在胞浆中进行，但脂肪酸合成所需要的原料乙酰-CoA在线粒体内产生，这种物质不能直接穿过线粒体内膜，在细胞内如何解决这一问题?

答：依赖存在于线粒体内膜上的柠檬酸转运系统进行转移(2);线粒体外草酰乙酸与乙酰辅酶A合成柠檬酸，经膜上柠檬酸-草酰乙酸双向转运体运进膜内，同时将草酰乙酸运出膜外(3)。