2022年自考《妇产科护理学》模拟试题及答案三(3)
五、名词解释题(每小题2分)
1.DNA印渍技术【DNA印渍技术也称为Southem blotting,是将基因组DNA经限制性内切酶消化后进行琼脂糖凝胶电泳,再将胶中的DNA分子转移到NC膜上进行杂交反应的技术主要用于基因组NDA的分析。】
2.RNA印渍技术【RNA印渍称为Northern blotting,指RNA经电泳分离后转移至膜性支持物上用于杂交反应的技术。】
3.蛋白质印渍技术【蛋白质印渍分析也称为Westem blotting或免疫印渍技术,指蛋白质在电泳分离之后转移到NC膜上,再与溶液中的其它蛋白探针相互结合的技术。】
4.探针(Probe)【用同位素、生物素或荧光染料标记DNA分子的末端或全链的一段多聚核苷酸可以称为探针,用于与已经用印渍技术固定在NC膜上的DNA或RNA进行结合反应。】
六、问答题
1.PCR技术的工作原理是什么?(5分)
【变性:使模板DNA完全变性成为单链
退火:使引物与模板DNA退火结合
延伸:DNA聚合酶以dNTP为底物催化DNA合成反应。】
七、论述题
1.印渍杂交的主要实验方法有哪些?主要用途是什么?(6分)
【目前常用的生物大分子印渍技术包括:
(1):DNA印渍技术(DNA blotting),被广泛称为Southern blotting。它主要用于基因组DNA的分析,尤其是用于某种基因在基因组中的定位研究,也可以用于分析重组质粒和噬菌体。
(2)RNA印渍技术(RNA blotting),也称为Northern blotting。主要用于检测某一组织或细胞中已知的特异mRNA的表达水平以及比较不同组织和细胞的同一基因的表达情况。
(3)蛋白质的印渍分析,也称为免疫印渍技术(immunoblotting)或Western blotting。主要用于检测样品中特异性蛋白质的存在、细胞中特异蛋白质的半定量分析以及蛋白分子的相互作用研究等。
斑点印渍、原位杂交也是常用的分子杂交方法。在此基础上发展起来的DNA芯片可以在小面积的表面固定数千甚至上万个探针用于细胞样品中基因表达谱及基因突变的分析。生物芯片对核酸的研究工作以及未来的诊断技术都将产生革命性的影响。】
2.核酸分子杂交的主要实验方法有哪些?主要用途是什么?(8分)
【目前常用的生物大分子印渍技术包括:
(1):DNA印渍技术(DNA blotting),被广泛称为Southern blotting。它主要用于基因组DNA的分析,尤其是用于某种基因在基因组中的定位研究,也可以用于分析重组质粒和噬菌体。
(2)RNA印渍技术(RNA blotting),也称为Northern blotting。DNA印渍技术主要用于检测某一组织或细胞中已知的特异mRNA的表达水平以及比较不同组织和细胞的同一基因的表达情况。
(3)斑点杂交,不经电泳分离直接将样品点在NC膜上用于杂交。
(4)原位杂交在组织切片或涂片上进行杂交。
(5)DNA芯片可以在小面积的表面固定数千甚至上万个探针用于细胞样品中基因表达谱及基因突变的分析。生物芯片对核酸的研究工作以及未来的诊断技术都将产生革命性的影响。】